利用間充質(zhì)干細(xì)胞 / 基質(zhì)細(xì)胞移植物進(jìn)行治療性血管生成，在預(yù)防重癥肢體缺血患者截肢方面的效果有限且存在爭(zhēng)議。通過(guò)對(duì)人體組織的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析，我們鑒定出特指來(lái)自皮下脂肪組織（AT）的 CD271+祖細(xì)胞，其具有促血管生成基因特征，且與其他干細(xì)胞群不同。與傳統(tǒng)脂肪基質(zhì)細(xì)胞移植物相比，AT-CD271+祖細(xì)胞在肢體缺血異種移植模型中表現(xiàn)出強(qiáng)大的體內(nèi)血管生成能力，具體特征包括長(zhǎng)期植入、組織再生增強(qiáng)以及血流恢復(fù)。機(jī)制上， CD271+祖細(xì)胞的血管生成能力依賴(lài)于功能性CD271和 mTOR 信號(hào)通路。值得注意的是，胰島素抵抗供體中該祖細(xì)胞的數(shù)量和血管生成能力降低。本研究強(qiáng)調(diào)了 AT- CD271+祖細(xì)胞在肢體缺血治療中具有體內(nèi)療效，同時(shí)展示了全面的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)策略在鑒定細(xì)胞治療合適移植物中的應(yīng)用價(jià)值。

本研究聚焦重癥肢體缺血的細(xì)胞治療突破，發(fā)現(xiàn)脂肪組織 CD271+祖細(xì)胞具有促血管生成能力，而Omegazone OZ-2 激光散斑血流成像儀為該發(fā)現(xiàn)的驗(yàn)證提供了關(guān)鍵技術(shù)支持。研究中采用OZ-2對(duì)肢體缺血模型小鼠的血流恢復(fù)情況進(jìn)行量化：通過(guò)檢測(cè)缺血肢體與健康肢體的血流信號(hào)比值，直觀驗(yàn)證了 AT- CD271+祖細(xì)胞治療后，小鼠肢體血流可恢復(fù)至接近健康水平，且效果優(yōu)于CD271- 細(xì)胞及傳統(tǒng)脂肪基質(zhì)細(xì)胞。

研究結(jié)論如下：

1. 單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)成功篩選出脂肪組織來(lái)源的  CD271+祖細(xì)胞，其促血管生成基因特征顯著優(yōu)于骨髓、臍帶血等其他干細(xì)胞來(lái)源，是重癥肢體缺血（CLI）治療性血管生成的理想細(xì)胞群。

2.  CD271+祖細(xì)胞的血管生成功能依賴(lài) CD271/mTOR 信號(hào)軸，該信號(hào)通路的完整性是其發(fā)揮治療作用的關(guān)鍵；CD271 不僅是細(xì)胞篩選的表面標(biāo)志物，更直接參與調(diào)控血管生成相關(guān)因子的表達(dá)。

3. 胰島素抵抗會(huì)導(dǎo)致  CD271+祖細(xì)胞數(shù)量減少、功能受損，而 HOMA-IR（胰島素抵抗指數(shù)）可作為預(yù)測(cè)該祖細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的替代標(biāo)志物，為臨床供體篩選提供參考。

4. 臨床回顧性分析顯示，SVF（血管基質(zhì)部分）治療中注入的  CD271+祖細(xì)胞數(shù)量與 CLI 患者的康復(fù)率呈正相關(guān)，每潰瘍面積注入 300,000-500,000 個(gè) AT- CD271+祖細(xì)胞有望獲得良好治療結(jié)局，且該劑量在心血管疾?。?/span>CVD）患者中易于制備。

5. 靶向CD271篩選細(xì)胞移植物的策略，有望改善當(dāng)前治療性血管生成的臨床效果，為無(wú)血管重建選項(xiàng)的 CLI 患者提供新的治療方向。

E：細(xì)胞治療后 14 天的激光多普勒成像圖

F：血流定量分析結(jié)果，對(duì)比 CD271+祖細(xì)胞、CD271 - 細(xì)胞及 PBS 對(duì)照組的血流恢復(fù)差異

該儀器的應(yīng)用為CD271+祖細(xì)胞的體內(nèi)治療效能提供了客觀、可靠的血流動(dòng)力學(xué)證據(jù)，支撐了其作為臨床細(xì)胞治療移植物的可行性；同時(shí)在胰島素抵抗供體來(lái)源的祖細(xì)胞治療評(píng)估中，OZ-2也呈現(xiàn)了不同供體來(lái)源細(xì)胞的療效差異，進(jìn)一步凸顯了供體篩選的重要性。